骨組織染色 trap染色試劑盒 本生

　　規(guī)格：50ml+11ml+10ml

　　保質(zhì)期：6個月有效

　　產(chǎn)品名稱：trap染色試劑盒

　　保存條件：4℃避光

　　產(chǎn)品簡介：

　　酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)  遍布各種組織，分布為廣泛，因為主要存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，所以通常被當(dāng)作溶酶體標(biāo)志酶。而溶酶體外的酸性磷酸酶存在于胞質(zhì)內(nèi)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。不同種類的動物體內(nèi)所含的酸性磷酸酶也不同，酸性磷酸酶的適宜pH范圍在4.5～5.5之間。白血病人脾臟和正常人肺泡巨噬細(xì)胞存在的的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resis  acid  phosphatase，TRAP)并不是釋放入血液，而是在細(xì)胞濾泡中。血液中絕大多數(shù)的TRAP來源于破骨細(xì)胞，因此可以通過測量血液中的TRAP了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。

　　伊勢久抗酒石酸酸性磷酸酶染色液將萘酚AS-BI作為底物，在酸性pH條件下被酸性磷酸酶水解釋放出萘酚和磷酸，萘酚可以偶聯(lián)重氮鹽從而生成定位于細(xì)胞質(zhì)中的有色產(chǎn)物，如果細(xì)胞內(nèi)的ACP有抗酒石酸的活性，則呈陽性反應(yīng)。該染色液不僅可用于細(xì)胞涂片、新鮮血涂片，還可以用于石蠟切片、冰凍切片。

　　組成：

　　產(chǎn)品名稱SS001-50ml+11ml+10mlStorage

　　試劑(A): TRAP 固定液50 ml4 ℃ 避光

　　試劑(B): TRAP

　　孵育液B1: AS-BI Buffer1 ml-20 ℃ 避光

　　B2: 顯色液2×0.5 ml4 ℃ 避光

　　B3: TRAP Buffer9 mlRT避光

　　臨用，將 B2 的顯色液Ⅰ和顯色液Ⅱ二支等比例混合均勻，再按B1:B2:B3=1:1:9 混合，即為 TRAP 孵育液，即配即用。

　　試劑(C): 蘇木s染色液10 mlRT 避光

　　說明書1份

　　儲存條件：

　　6個月有效。

　　自備材料：

　　1、 恒溫箱、蒸餾水。

　　2、 載玻片、推玻片。

　　光學(xué)顯微鏡。

　　操作步驟(僅供參考)：

　　(一)血液、細(xì)胞涂片：

　　1、  推片：在載坡片上放置新鮮血液或骨髓涂片，于載玻片處將推玻片保持30度，置于細(xì)胞滴液或血液的正方，往后稍微移動與血液或細(xì)胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開，此時沿載玻片平面勻速平穩(wěn)向滑動直至鋪滿血膜為止。

　　2、 自然晾干后使用TRAP固定液固定。

　　3、 水洗，略微晾干(不易過分干燥)。

　　(二)冰凍切片：

　　1、 冰凍切片回溫后放于水中浸泡。

　　2、 自然晾干后使用TRAP固定液固定。

　　3、 水洗，略微晾干(不易過分干燥)。

　　4、 切片放入TRAP孵育液，置于溫箱，避光浸染，水洗。

　　(三)石蠟切片：

　　1、 石蠟切片脫蠟，重復(fù)此步驟一次。

　　2、 無水乙醇，90 %乙醇和70 %乙醇。

　　3、 水洗。

　　4、 自然晾干后使用TRAP固定液固定。

　　5、 水洗，略微晾干(不易過分干燥)。

　　染色結(jié)果：

　　陽性顆粒細(xì)胞核

　　紫紅色藍(lán)色

　　臨床意義：

　　1、 毛細(xì)胞白血病的毛細(xì)胞ACP染色后呈現(xiàn)出中度陽性或強陽性，且酒石酸無法抑制，此時其他細(xì)胞均呈現(xiàn)弱陽性或陰性。

　　原粒細(xì)胞對ACP反應(yīng)不一，急性白血病幼單核細(xì)胞ACP染色呈現(xiàn)陽性，原淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)弱陽性。

　　3、 T淋巴細(xì)胞ACP染色呈現(xiàn)陽性，顆粒粗大、分布密集。B淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)陰性或顆粒細(xì)小的弱陽性。

　　4、 戈謝細(xì)胞呈現(xiàn)強陽性，尼曼-皮克細(xì)胞呈現(xiàn)陰性或弱陽性。

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