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酶聯免疫吸附測定(ELISA)的核心類型與應用比較
以下是酶聯免疫吸附測定(ELISA)的核心類型及應用比較,本生結合技術原理與典型場景分析:
1. 直接ELISA?
原理?:抗原直接包被于固相載體,酶標一抗直接結合顯色?。
特點?:
優點?:步驟少(僅需一抗)、交叉反應風險低?。
缺點?:信號較弱,每種抗體需單獨標記?。
應用?:
高豐度抗原檢測(如病毒顆粒、重組蛋白)?。
細菌表面抗原(如LPS)快速篩查?。
2. 間接ELISA?
原理?:未標記一抗結合抗原后,酶標二抗放大信號?。
特點?:
優點?:信號強度提升5-10倍,適合多抗體檢測?。
缺點?:步驟較多,二抗可能引發交叉反應?。
應用?:
抗體滴度測定。
自身免疫病篩查(如抗核抗體)?。
3. 夾心ELISA?
原理?:雙抗體夾心結構(捕獲抗體+檢測抗體)?。
特點?:
優點?:靈敏度達pg/mL級,特異性強(需雙表位)?。
缺點?:抗原需足夠大(≥兩個表位),需配對抗體?。
應用?:
微量蛋白檢測(如IL-6、TNF-α)?。
腫瘤標志物定量(如CEA、PSA)?。
4. 競爭ELISA?
原理?:樣本抗原與標記抗原競爭結合有限抗體,信號與濃度負相關?。
特點?:
優點?:適合小分子(半抗原),基質耐受性好?。
缺點?:信號與濃度負相關,優化復雜?。
應用?:
小分子檢測(如激素、藥物濃度)?。
環境污染物(如農藥殘留)?。
類型選擇建議?
檢測目標特性? ?推薦類型?
大分子抗原(>10 kDa) 直接ELISA/夾心ELISA
抗體滴度測定 間接ELISA
低豐度蛋白(pg級) 夾心ELISA
小分子(<1 kDa) 競爭ELISA
如需進一步優化實驗設計,可結合樣本特性與檢測目標選擇適配方法?。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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